ASTM F3088-14
遠心分離を使用した細胞物質との接着相互作用の定量測定/研究のための標準試験法
- 規格番号
- ASTM F3088-14
- 制定年
- 2014
- 出版団体
- American Society for Testing and Materials (ASTM)
- 状態
- に置き換えられる
- ASTM F3088-22
- 最新版
- ASTM F3088-22
- 範囲
- 4.1 この試験方法は、通常は短時間、基板に接着した細胞の所定の RCF での剥離パーセントを提供するために使用できる細胞接着方法について説明します。 この試験方法によって生成された情報は、同じ基板上の参照 (接着) 細胞タイプと比較した場合、コーティングされていない基板またはプレコートされた基板への細胞の接着の半定量的な測定値を得るために使用できます。 Reyes と Garcia (2003) に記載されているように、接着強度の最も確実な測定には、リガンド濃度または RCF のいずれかに 50 % ポイントを使用することが推奨されます。 接着力は、細胞の表現型の変化、または表面の特定の特性の結果によって変化する可能性があります。 基板には、組織培養処理したポリスチレン、生体材料、または生体活性表面が含まれる場合があります。 基材がヒドロゲルの場合、ヒドロゲルの凝集破壊（つまり、剥離した細胞がゲルの断片を引き離す）を避けるために注意する必要があります。 コーティングは、天然または合成の生体材料、ヒドロゲル、細胞外マトリックス (ECM) の成分、リガンド、接着分子または生物活性分子、遺伝子または遺伝子産物から構成されます (ただし、これらに限定されません)。 細胞濃度が高すぎると、細胞が個々の細胞としてではなくシートとして剥がれてしまう可能性があるため、細胞濃度も重要です。 この遠心分離アプローチは、検証されれば、品質管理 (QC) や製品開発に適用できる可能性があります。 ただし、この方法が細胞接着の他の測定値と相関するまでは、現在の方法は細胞接着の他の既知の測定値と並行して実行する必要があります。 4.2 この検査方法には、免疫染色によって特定される遺伝子発現の変化またはバイオマーカーの変化を定量化するための検査方法は含まれません。 さらに、このテスト方法は定量的な画像分析技術をカバーしていません。 場合によっては、接着特性の変化が細胞の分化または脱分化の程度を反映している可能性があります。 ただし、多くの場合、接着相互作用は特定の細胞型の分化状態を反映しているとはいえ、必ずしも反映しているわけではないことは注目に値します。 (軟骨細胞の接着への適用については X1.3 を参照。 ) 1.1 この試験方法は、継代または処理による細胞の接着特性の変化を検出するために使用できる遠心分離細胞接着アッセイを対象としています。 このアプローチでは、細胞を基板から引き離すのに必要な力を測定します。 多くの変数の中でも接着は、細胞の表現型の変化により変化する可能性があります。 1.2&# この試験方法は、表面のコーティングの均一性を検証する方法や、表面の特性を評価する方法をカバーしていません。 1.3 細胞には、あらゆる種の成体細胞、前駆細胞、または幹細胞が含まれます。 細胞の種類には、軟骨細胞、線維芽細胞、骨芽細胞、島細胞、または他の関連する接着細胞タイプが含まれ得る。 1.4 この試験方法は細胞の単離または採取方法を対象としていません。 この検査方法には、免疫染色によって同定される遺伝子発現の変化、またはバイオマーカーの種類や濃度の変化を定量するための検査方法は含まれていません。 また、このテスト方法は定量的な画像解析技術もカバーしていません。 1.5&# この規格は、その使用に関連する安全上の懸念がある場合、そのすべてに対処することを目的とするものではありません。 適切な安全衛生慣行を確立し、使用前に規制上の制限の適用可能性を判断することは、この規格のユーザーの責任です。
ASTM F3088-14 規範的参照
- ASTM F2603 ポリマー組織足場の画像解釈のための標準ガイド
- ASTM F2664 生体材料表面への細胞付着の物理的評価のための標準ガイド
- ASTM F2739 生体材料足場内の細胞生存率および関連特性を定量化するための標準ガイド
- ASTM F2944 自動コロニー形成ユニット (CFU) 分析の標準的な手法 培養中の細胞とコロニーを計数および特性評価するための画像取得および分析方法
ASTM F3088-14 発売履歴
- 2022 ASTM F3088-22 標準的な細胞遠心法を使用した材料/細胞相互作用の定量的研究
- 2014 ASTM F3088-14 遠心分離を使用した細胞物質との接着相互作用の定量測定/研究のための標準試験法
