ASTM F3106-14
In Vitro 骨芽細胞分化アッセイの標準ガイド
- 規格番号
- ASTM F3106-14
- 制定年
- 2014
- 出版団体
- American Society for Testing and Materials (ASTM)
- 状態
- に置き換えられる
- ASTM F3106-22
- 最新版
- ASTM F3106-22
- 範囲
- 4.1 このガイダンス文書は、混合組織由来の結合組織を含む、さまざまなヒトまたは動物源由来の前駆幹細胞の骨形成能をスクリーニングするために使用できる、in vitro 骨芽細胞分化アッセイに使用されるコンポーネントと条件について説明しています。 前駆細胞集団、または培養拡大、処理、トランスフェクション、または遺伝子改変を通じて選択的に単離または操作できる細胞集団。 4.2 骨芽細胞分化アッセイは、骨形成アッセイまたは石灰化アッセイと呼ばれることがあります。 4.3 多量の骨形成培地成分は、骨芽細胞の分化を示さないジストロフィック、病理学的、または人為的なカルシウムベースの沈殿を引き起こす可能性があるため、in vitro 骨芽細胞分化アッセイに使用する成分と条件を慎重に選択することが重要です。 3 たとえば、細胞が分泌する酵素アルカリホスファターゼの基質として機能させるために高濃度のβ-グリセロリン酸が培地に使用されると、遊離リン酸が顕著に増加します。 その後、培地中で Ca++ イオンとともに沈殿し、前駆細胞の分化状態とは無関係にリン酸カルシウム結晶を形成します (2、3)。 4.4 アルカリホスファターゼの産生は、骨芽細胞の分化に関連する初期のイベントですが、骨形成サプリメントであるデキサメタゾンを培地に添加することによって、他の細胞タイプでも刺激される可能性があります。 アルカリホスファターゼは、石灰化マトリックスを産生する骨芽細胞による骨シアロタンパク質およびオステオカルシンの発現と通常同時に起こる、骨内での石灰化沈着物の形成を促進します。 したがって、これらの種類の石灰化/鉱物沈着物は、成熟骨芽細胞によって開始されたものではないため、ジストロフィー、病理学的、または人工物であると考えられます。 したがって、蛍光画像解析を使用した前駆細胞の骨形成培養におけるカルシウム沈着の定量化に関する実践 F2997 に記載されているようなカルシウム測定は、遺伝子や遺伝子を使用せずに単独で使用された場合、骨前駆細胞の分化状態の潜在的に誤った解釈をもたらす可能性があります。 タンパク質発現データ。 4.5 未分化幹細胞の多分化能のスクリーニングに加えて、骨芽細胞分化アッセイは、細胞培養基質、生体材料足場、薬物、生体分子の骨誘導性を評価するのに役立ちます。 サイトカインや成長因子など。 4.6&# インビトロ骨芽細胞分化アッセイは、インビボ骨形成を予測するものではありませんが、標準との比較目的には役立ちます。
ASTM F3106-14 規範的参照
- ASTM F2312 組織工学的医療製品に関する標準用語
- ASTM F2997 蛍光画像解析を使用して前駆細胞の骨形成培養におけるカルシウム沈着を定量化するための標準的な手法*， 2024-04-09 更新するには
ASTM F3106-14 発売履歴
- 2022 ASTM F3106-22 in vitro 骨芽細胞分化アッセイの標準ガイド
- 2014 ASTM F3106-14 In Vitro 骨芽細胞分化アッセイの標準ガイド
