T/AHFIA 043-2019
高速液体クロマトグラフィーによる酒類中のα-リノレン酸およびL-フェニル乳酸の定量 (英語版)

規格番号

T/AHFIA 043-2019

言語

中国語版, 英語で利用可能

制定年

2019

出版団体

Group Standards of the People's Republic of China

最新版

T/AHFIA 043-2019

範囲

主な用語: この規格の各章は、範囲、試薬と材料、主な機器、測定手順、結果の計算、精度、検出限界、および方法の不確かさで構成されています。 この規格の主な技術パラメータと実験検証パラメータは次のとおりです: 1. 主要な技術パラメータの確認 1.1 クロマトグラフィー カラム  T3 および BEH C18 クロマトグラフィー カラムの選択 単一因子変数法を使用することにより、最終的に、 BEH C18 クロマトグラフィー カラムは分離に優れており、α-リノレン酸と L-フェニル乳酸を完全に分離できます。 クロマトグラムを図 1 に示します。 図 1 は以下を示します: 標準サンプルのクロマトグラム 1.2 移動相の選択 実験用の移動相の選択では、最初に水-メタノール、酢酸-メタノール、水-アセトニトリルを選択しました。 実験を経た結果、効果が薄く、うまく分離できないことが分かりました。 両物質の分離には低濃度のリン酸の使用が大きな役割を果たすことが分かり、移動相として1%、0.5%、0.1%のリン酸溶液をそれぞれ用意して実験を行ったところ、次のことが分かりました。 0.1%リン酸を使用した方が分離効果が高く、ピーク形状も良好で使用条件を満たしているため、α-リノレン酸とL-リノレン酸の分離実験では移動相として0.1%リン酸を選択しました。 フェニル乳酸。  1.3 波長の選択 文献検索と実験の実施により、 実験を系統的にまとめ、実験段階でまとめました。 210～500nmの波長範囲でスキャンすることで、対応する3Dスキャンが得られます。 その後の抽出クロマトグラムと文献報告により、最適な検出波長は 205nm であることが判明しました。 標準サンプル検証では、対応する波長検証を実行します。 2. 実験検証の技術パラメータが決定された後、標準設定チームは精度、再現性、安定性、および回復テストを通じて効果を検証し、得られた並行測定結果の相対標準偏差 RSD% はすべて 5 未満であり、その結果は精度は方法論的要件に準拠しており、この方法の標準化、均一性、科学的性質を向上させるために、オフサイト検証テストと方法の不確実性計算を実施しました。 2.1 検量線の作成 α-リノレン酸とL-フェニル乳酸の混合標準液を正確に吸収し、5種類の濃度の溶液を調製します（α-リノレン酸検量線濃度：20mg/L、40mg/L、80mg/L、 160mg/L、400mg/L、L-フェニル乳酸標準曲線濃度：25mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L、500mg/L）。 5 つの濃度の標準混合作業溶液を決定し、横軸に濃度、縦軸にピーク面積を使用して標準曲線を描きます; R2=0.998、良好な直線性。 2.2 精度 同じ酒類サンプルについて、サンプル調製方法サンプルに従って 6 コピーを並行して調製し、この方法を使用して α-リノレン酸および L-フェニル乳酸を検出しました（1 つのサンプルを 6 回繰り返し注入）。 再現性試験の結果を表 1 および表 2 に示します    表 1 α-リノレン酸および L-フェニル乳酸の再現性 試験結果  .96 50.52 51.39 1.10% 表 1 から、 6 回の繰り返し測定結果は 2.20% と 1.08% であり、この方法の再現性は良好です。 表2 α-リノレン酸とL-フェニル乳酸の再現性試験結果 回数 1 2 3 4 5 6 RSD L-フェニル乳酸 415.32  398.10  401.26  450.22  438.30  38 7.62  ; 4.92% α-リノレン酸 399.62  396.24  402.64  401.28  404.64  403.16  7.46% 上記表 2 より、再現性測定結果の RSD は 4.92% および 7.4 となります。 6%、再現性 良いセックス。 2.3 添加回収実験: α-リノレン酸と L-フェニル乳酸の含有量がそれぞれ 48.62 mg/L と 15.45 mg/L であることがわかっている 3 つのサンプルを採取し、既知の濃度の α-リノレン酸と L-フェニル乳酸を使用します。 乳酸標準を用いて 3 つの濃度レベルの乳酸を調製し、標準に記載されている方法に従って処理および試験したところ、計算された回収率はすべて 80% ～ 120% 以内でした (以下の表 3 を参照)。 表 3 ワインサンプル中のα-リノレン酸および L-フェニル乳酸の添加回収率の実験結果 添加物質基質濃度 (mg/L) 添加レベル (mg/L) 40 100 400 実績値 回収率 実績値 回収率 実績値 回収率 L-フェニル乳酸 15.45 47.95 81.25% 112.85 97.40% 346.07 82.66% α-リノレン酸 48.62 85.12 91.25% 145.92 97.30% 415.14 91.63% 2.4 方法の検出限界および定量限界     以下を実施しますこの方法の感度試験: 感度試験には機器の感度と方法の感度が含まれます. 機器の感度は機器の検出限界で表されます. L-フェニル乳酸とα-リノレン酸の混合物を採取します信号対雑音比が 3 以上の酸 標準溶液の最小濃度は機器の検出限界であり、メソッドの感度はメソッドの定量限界によって表されます 混合標準液の最小濃度S/N 比が 9 以上の L-フェニル乳酸と α-リノレン酸の溶液がメソッドの定量限界です。 得られた関連データを表 4 に示します。      表4 ワインサンプル中のα-リノレン酸およびL-フェニル乳酸の定量限界および検出限界のデータ名 検出限界 mg/L 定量限界 mg/L L-フェニル乳酸 1.00 5.00 α-リノレン酸 1.00 5.00 2.5 オフサイト検証実験 この方法は、安徽国科試験技術有限公司の液相液品質実験室とオフサイト実験室で検証されています。 結果は表 5 のとおりです。 表 5 ワインサンプル中のα-リノレン酸とL-フェニル乳酸のオフサイトラボでの比較結果

T/AHFIA 043-2019 発売履歴

• 2019 T/AHFIA 043-2019 高速液体クロマトグラフィーによる酒類中のα-リノレン酸およびL-フェニル乳酸の定量