T/AFFI 011-2022
液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析による果実製品中のジベレリンおよびクロフェヌロン残留物の定量 (英語版)

規格番号

T/AFFI 011-2022

言語

中国語版, 英語で利用可能

制定年

2022

出版団体

Group Standards of the People's Republic of China

最新版

T/AFFI 011-2022

範囲

果物製品中のジベレリンおよびクロフェヌロン残留物の測定 液体クロマトグラフィー - タンデム質量分析 1  適用範囲 この文書は、新疆ウイグル自治区のレーズン、レッドデーツおよびその他の果物製品に適用されます。 この文書は、レーズンや赤いナツメヤシなどの果物製品に含まれる植物成長調節物質（ジベレリンとクロフェヌロン）の試験方法を規定しています。 2  基準参照文書  この文書で引用されている文書は、この文書の適用に不可欠です。 日付付きの参照ドキュメントの場合、日付付きのバージョンのみがこのドキュメントに適用されます。 日付のない参照文書については、最新バージョン (すべての修正を含む) がこの文書に適用されます。 GB/T 様々な加工技術・工法で作られた製品。 3.2 植物成長調節剤は、天然の植物ホルモンと同様の成長および発育調節効果を有する、人工的に合成された (または微生物から天然に抽出された) 有機化合物です。 この文書では主にジベレリン (GA3) とフォルクロルフェヌロン (4-CPPU) について言及します。 4  5  試薬および材料 特に指定のない限り、分析グレードであることが確認された試薬および GB/T 6682 で指定された一級水のみが分析に使用されます。 5.1  ; 5.1.5 クエン酸ナトリウム二水和物 (分析的に純粋); 5.1.6 クエン酸二ナトリウム塩 1.5 水和物 (分析的に純粋); 5.1.7 1% ギ酸-アセトニトリル溶液: 10 mL のギ酸を測定します。 1000mL の全量フラスコに入れてよく混ぜます; 5.1.8 0.1% ギ酸水溶液: 1mL のギ酸を量り、1000mL の全量フラスコに純水を加えて均一に混合します。 5.2 標準品 8)、純度は 99% 以上です。 5.3  標準溶液の調製 5.3.1 混合標準原液 (1 mg/mL) の調製: ジベレリンおよびクロフェヌロン標準液をそれぞれ 10 mg 正確に量り、メタノールで 10 mg に希釈します。 mL、-18 で冷凍保存°C、遮光で保存し、12 か月間有効です。 5.3.2 混合標準中間溶液 (10μg/mL) の調製: 混合標準原液 1.0 mL を正確にピペットで採取し、メタノールで 100 mL に希釈し、凍結して暗所で -18°C で保存します。 有効期間は 6 か月間です。 5.4 材料 5.4.1 エチレンジアミン-N-プロピルシラン化シリカゲル (PSA): 粒径: 40~60 μm; 5.4.2 オクタデシルシラン結合シリカゲル (C18): 粒径: 50μm; 5.4.3 黒鉛化カーボンブラック (GCB):粒径 40~120μm; 5.4.4 セラミック均質プロトン: 2cm (長さ) × 1cm (外径) または同等品; 5.4.5 微多孔性フィルター膜: 13mm×0.22μm または同等品。 6  機器および装置 6.1 液体クロマトグラフィートリプル四重極質量分析計:エレクトロスプレーイオン化源 (ESI) を装備; 6.2 電子天秤:感度 0.01g および 0.01 mg; 6.3 遠心分離機:速度以上5000 rpm; 6.4 超音波洗浄機; 6.5 ティッシュマッシャー。 6.6 ボルテックスミキサー。 7  7.2  サンプルの抽出 2 g の破砕サンプル (0.01g までの精度) を正確に量り、50 mL 遠心分離管に入れ、10 mL の 1 % ギ酸-アセトニトリル抽出溶液、1 つのセラミック均質プロトン、およびボルテックスで 30 秒間よく混合し、塩化ナトリウム 5 ～ 7g、クエン酸ナトリウム二水和物 1g、クエン酸二ナトリウムセスキ水和物 0.5g を加え、ボルテックスで 30 秒間混合し、20 分間超音波抽出し、5000 rpm で 5 分間遠心分離します。 上清 2 mL を、無水硫酸マグネシウム 150 mg、PSA 50 mg、および C18 50 mg を含むプラスチック製の遠心管に移します。 色の濃いサンプルの場合は、遠心管に別の管を追加します。 GCB 50 mg を加えます。 ボルテックスして 30 秒間混合し、1 分間静置し、上清フィルター膜 (5.4.5) を測定のために採取します。 7.3 測定 7.3.1 液体クロマトグラフィー基準条件 カラム：Hypersil GOLD C18 カラム（2.1 mm × 100 mm、粒子径 1.9 μm）、または同等の性能のカラム 移動相：A：0.1% ギ酸-水、B：メタノールグラジエント溶出手順を表 1 に示します; 流速: 0.2 mL/min; カラム温度: 40℃; 注入量: 1 μL。 表 1  グラジエント溶出プログラム時間/分 VA VB 0.0 90 10 2.0 90 10 5.0 10 90 7.0 10 90 7.5 90 10 10.0 90 10 7.3.2  質量分析基準条件 イオン源の種類: エレクトロスプレー イオン化源。 スキャン中方法: 多重反応モニタリングモード (Multiple Reaction Monitoring、MRM)、正イオンと負イオンを同時にスキャン、2 つの物質の親イオンとプロダクトイオンの質量スペクトル情報を表 2 に示す; エレクトロスプレー電圧: 正イオン 3500V;マイナスイオン 2500 V イオン源温度: 350 ℃; 噴霧ガス: 40 Arb; 補助ガス: 10 Arb。 表 2 ジベレリンおよびクロルフェヌロンの親イオンおよびプロダクトイオンの質量スペクトル情報 化合物名 イオン化モード 親イオン プロダクトイオン 衝突エネルギー (V) デクラスタリング電圧 (V) ジベレリン マイナス 345.15 239.19*/143.14 -14.06/ -28.17 -115 クロルフェヌロン陽性 248.22 129.07*/93.12 16.29/31.71 82 注: * は定量的イオンを示します 7.3.3   マトリックス標準曲線を描くには、7.1 および 7.2 に従って試験するサンプルと同じまたは類似の特性を持つブランクサンプルを選択します。 メソッドを使用して処理して、ブランク マトリックス ソリューションを取得します。 混合標準中間溶液を一定量正確に量り、ブランクマトリックス溶液で質量濃度 0.005μg/mL、0.010μg/mL、0.020μg/mL、0.050μg/mL、マトリックスマッチングまで段階的に希釈します。 0.100 /mL および 0.200 /mL の標準シリーズ作業溶液。 機器の性能と検出のニーズに応じて、液体クロマトグラフィー - トリプル四重極質量分析計による分析には 5 つ以上の濃度ポイントが選択されます。 ジベレリンとクロルフェヌロンの定量イオンのクロマトグラフィーのピーク面積を縦軸とし、対応するマトリックス対応標準系列作業液の濃度を横軸として検量線を作成した。 7.3.4 定性的および定量的 7.3.4.1 保持時間 試験対象成分のクロマトグラフピークの保持時間は、対応する標準クロマトグラフピークの保持時間に近く、相対誤差は ±2.5% 以内である必要があります。 7.3.4.2 イオン存在比 同じ実験条件下で、検出サンプル中の被験成分のクロマトグラフィーピークの保持時間と、対応する標準クロマトグラフィーピークの保持時間が 7.3.3.1 の要件を満たしている場合、バックグラウンド サンプルのマススペクトルにおいて、測定対象化合物の選択された 2 つのプロダクトイオンが両方とも出現し、同一検出バッチ、同一化合物において、サンプル中の測定対象化合物のプロダクトイオンのプロダクトイオン存在比が等しい。 マトリックス標準液のプロダクトイオンと同等の質量濃度の偏差が表 3 に指定された範囲を超えない場合、試料中に被験化合物が存在すると判断できます。 表 3 定性分析時のイオン存在比の最大許容偏差  イオン存在比＞50＞20~50＞10~20 ≤10 許容偏差 ±20 ±25 ±30 ±50 7.3.4.3 定量定量は外部定量標準化を採用します。 7.4 ブランク実験は、サンプルを添加しないことを除いて、上記の測定条件および手順に従って実行するものとする。 8  結果の計算式(1)により、試料中のジベレリンおよびクロルフェヌロンの残存量を計算します。         ここで: 濃度、ng/mL、m-サンプル質量、g、V-サンプル抽出溶液の総量、mL、1000 単位換算係数、注: 計算結果有効数字 3 桁を保持します。 9  精度とは、再現性条件下で得られた 2 つの独立した測定結果間の絶対差が算術平均の 10% 以下であることを意味します。

T/AFFI 011-2022 発売履歴

• 2022 T/AFFI 011-2022 液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析による果実製品中のジベレリンおよびクロフェヌロン残留物の定量
• 2021 T/AFFI 011-2021 赤い日付の残留農薬検査基準