T/SAIA 001-2021
Bupleurum 種子の DNA 分子同定手順 (英語版)
- 規格番号
- T/SAIA 001-2021
- 言語
- 中国語版, 英語で利用可能
- 制定年
- 2021
- 出版団体
- Group Standards of the People's Republic of China
- 状態
- 2022-01
- に置き換えられる
- T/SAIA 001-2022
- 最新版
- T/SAIA 001-2022
- 範囲
- リアルタイム蛍光 PCR 技術に基づいてマルチプレックス リアルタイム蛍光 PCR 検出システムを確立し、DNA バーコード内の ITS 遺伝子配列を標的遺伝子として使用して、Bupleurum 用のユニバーサル プライマーとプローブ、および Bupleurum 用の特異的プライマーとプローブを設計しました。 針は、蛍光ポリメラーゼ連鎖反応システムと反応条件の最適化とスクリーニングを通じて、同じ PCR 反応で Bupleurum angustifolia と Bupleurum angustifolia を同時に識別できる複数のリアルタイム蛍光ポリメラーゼ連鎖反応法を確立しました。 システム. Bupleurum 種子の原料成分。 DNA 抽出: 各材料 0.3 g を混合し、液体窒素下で滅菌乳鉢で粉末に粉砕します。 2% β-メルカプトエタノールを含む CTAB 抽出バッファーを 65°C のウォーターバスで予熱します; 粉砕したサンプル 0.15g を 2.0mL 遠心管に入れます; 65°C に予熱した CTAB 抽出バッファー 700 μL を加えます バッファー、65 ℃でインキュベートします°Cで30分間、その間に3〜4回振盪し、700μLのクロロホルム/イソアミルアルコール(24:1)を加え、静かに反転させて完全に混合し、12000 r/minで10分間遠心分離し、上清を吸引し、別の遠心管に移し、上清を新しい遠心管に移し、-20℃に予冷したイソプロピルアルコール 2/3 量を加え、よく混合し、-20℃で 30℃ 分間または一晩置きます。 12000r/minで15分間遠心分離して沈殿を収集；700μLの70%無水エタノールを加えてすすぎ、12000r/minで2分間遠心分離し、上清を捨て、このステップを繰り返す；室温または超清浄でDNAを風乾する台中で 5 ～ 10 分間自然に静置し、50 μL の再蒸留水または TE バッファーを加え、ボルテックスして完全に混合し、12000 r/min で 2 分間遠心分離し、後で使用するために 4°C で保存するか、-20°C で保存します。 C.
T/SAIA 001-2021 発売履歴
- 2022 T/SAIA 001-2022 牛および羊の農場におけるブルセラ症のスポット根絶に関する技術仕様
- 2021 T/SAIA 001-2021 Bupleurum 種子の DNA 分子同定手順
