T/NAASS 057-2023
牛ヘルペスウイルス 4 型間接酵素免疫吸着法による抗体検出に関する技術基準 (英語版)

規格番号

T/NAASS 057-2023

言語

中国語版, 英語で利用可能

制定年

2023

出版団体

Group Standards of the People's Republic of China

最新版

T/NAASS 057-2023

範囲

用語と定義 以下の用語と定義がこの文書に適用されます。 ウシヘルペスウイルス 4、BoHV-4 ウシヘルペスウイルス 4 は、ヘルペスウイルス科、G ヘルペスウイルス亜科のモノウイルス属に属し、牛の生殖障害を引き起こす主要なウイルスの 1 つです。 間接酵素結合免疫吸着測定法 間接酵素結合 検出用に酵素標識二次抗体を添加し、基質を使用して発色させ、発色反応によって抗原を決定します。 ４ 間接酵素免疫吸着法操作試験の準備 実験環境、器具、装置、洗浄液の調製、希釈液の調製、トレーサー作業液の調製はキットの指示に従って行うものとする。 実験環境のバイオセーフティ条件は GB/T 19489 の要件に準拠する必要があり、希釈に使用される蒸留水は GB/T 6682 の要件に準拠する必要があります。 検査サンプル 新鮮または冷凍の血清、血漿、乳サンプルを直接検査に使用できます。 牛乳サンプルの調製：4000rpm/minで20分間遠心分離し、パスツールピペットを使用して中層の液体を吸収し、下層の細胞沈殿物に触れないように注意してください。 希釈していないスキムミルクを直接マイクロプレートに加えることができます。 操作手順: 使用前にすべての試薬を 21°C ± 3°C に戻し、軽く振ったり回転させたりして試薬を均一に混合します。 4.3.1 マイクロプレートを取り出す準備をし、操作記録シートにサンプルの位置をマークします。 マイクロプレートの一部を使用する場合は、サンプルを検出するのに十分な量のストリップのみを取り除きます。 未使用のマイクロウェル ストリップは、アルミホイルで包み、乾燥した状態に保ち、密封して 2 ℃～8 ℃で保管してください。 4.3.2 血清または血漿の希釈 血清または血漿はキットの要件に従って希釈する必要があり、溶血サンプルや凝固を伴うサンプルの使用は避けてください。 必要に応じてサンプルと希釈液をキットのマイクロプレートに加え、ピペットで混合します。 4.3.3 対照サンプル (陽性血清および陰性血清) およびトレーサーの希釈 陽性血清、陰性血清およびトレーサーは、キットの要件に従って希釈剤で希釈する必要があります。 4.3.4 サンプルの追加 サンプル (血清、血漿、または乳サンプル) を各ウェルに同じように追加します。 陽性血清をウェル A1 に、陰性血清をウェル A2 に、トレーサーをウェル A3 に、サンプル 1 をウェル A4 に、というように加えます。 4.3.5 マイクロプレートを密閉した後、キットの説明書に指定されている時間室温でインキュベートします。 4.3.6 洗浄: マイクロプレート内の液体を捨て、各プレートのウェルを約 300 μL の洗浄液で 3 回洗浄します。 洗浄後は、プレートの各ウェル内の液体を振り落としてください。 洗浄中および次の試薬を添加する前に、反応プレートが乾燥しないようにし、ウェル内に気泡が入らないようにしてください。 最後に振り落とした後、吸収材に水を加えてください。 . プレートをしっかりと押して残った液を吸収させます。 4.3.7 酵素複合体の希釈 必要に応じて、酵素複合体を希釈剤で希釈します。 4.3.8 酵素複合体の添加 各ウェルに酵素複合体を加え、よく振盪します。 マイクロプレートを密閉した後、キットの説明書に指定されている時間室温でインキュベートし、ステップ 4.3.6 に従って洗浄します。 4.3.9 基質の追加 基質溶液を各ウェルに追加します。 キットの説明書に指定されている時間、室温でインキュベートします。 4.3.10 停止液を各ウェルに加えて反応を停止させます。 4.3.11 吸光度値 (OD 値) の測定 マイクロプレートリーダーを 15 分間予熱し、停止液を加えてから 5 分以内にキットの説明書に指定されている波長で吸光度値を読み取ります。 実験的妥当性テストは、キットの説明書に指定された条件が満たされた場合にのみ有効です。 結果はキットの説明書に記載されている計算式を使用して計算されました。 結果はキットの説明書に記載の判定基準に基づき判定した。

T/NAASS 057-2023 発売履歴

• 2023 T/NAASS 057-2023 牛ヘルペスウイルス 4 型間接酵素免疫吸着法による抗体検出に関する技術基準