T/NAASS 058-2023
ウシコロナウイルスサンドイッチ酵素免疫吸着法による抗原検出に関する技術規制 (英語版)

規格番号

T/NAASS 058-2023

言語

中国語版, 英語で利用可能

制定年

2023

出版団体

Group Standards of the People's Republic of China

最新版

T/NAASS 058-2023

範囲

用語と定義 以下の用語と定義がこの文書に適用されます。 ウシコロナウイルス、BCVはコロナウイルス科に属し、新生子牛の下痢や成牛の気道感染症を引き起こす重要な病原体です。     サンドイッチ酵素結合免疫吸着アッセイサンドイッチ酵素結合免疫吸着アッセイ、sELISA  抗原に対するサンプルと酵素標識抗体をテストします。 対応する抗原は抗体に特異的に結合できます。 担体上の未結合物質と酵素標識抗体を洗浄し、酵素基質を加えて呈色反応を進め、抗原を決定します。 4 サンドイッチ酵素免疫測定法試験の準備 実験環境、器具、洗浄液の調製、希釈液の調製、トレーサー作業液の調製はキットの指示に従って行うものとする。 実験環境のバイオセーフティ条件は GB/T 19489 の要件に準拠する必要があり、希釈に使用される蒸留水は GB/T 6682 の要件に準拠する必要があります。 検体を検査する場合は、牛の糞便を採取し、等量の検体希釈液を加え、遠心分離せずに10分間自然沈降させ、糞便溶液の上清を1.5mL遠沈管に採取します。 操作手順：使用前にすべての試薬を18℃～24℃に戻し、軽く振ったり回転させたりして試薬を均一に混合します。 4.3.1 プレートを取り外す マイクロプレートを取り出し、操作記録シートにサンプルの位置をマークします。 マイクロプレートの一部を使用する場合は、サンプルを検出するのに十分な量のストリップのみを取り除きます。 未使用のマイクロウェル ストリップは、アルミホイルで包み、乾燥した状態に保ち、密封して 2 ℃～8 ℃で保管してください。 4.3.2 サンプルの追加 サンプルを各ウェルに追加し、サンプル 1 をウェル A1 と B1 に追加し、サンプル 2 をウェル C1 と D1 に追加します。 同様にポジティブコントロール (G1 や H1 など) を追加します。 4.3.3 マイクロプレートを密閉した後、キットの説明書に指定されている時間室温でインキュベートします。 4.3.4 洗浄: マイクロプレート内の液体を捨て、各プレートのウェルを約 300 μL の洗浄液で 3 回洗浄します。 洗浄後は、プレートの各ウェル内の液体を振り落としてください。 洗浄中および次の試薬を添加する前に、反応プレートが乾燥しないようにし、ウェル内に気泡が入らないようにしてください。 最後に振り落とした後、吸収材に水を加えてください。 プレートをしっかりとクランプし、残った液体を吸収します 4.3.5 酵素複合体の添加 各ウェルに酵素複合体を加え、よく振盪します。 密封後、キットの説明書に指定されている時間室温でインキュベートし、ステップ 4.3.4 に従って洗浄します。 4.3.6 基質の追加 基質溶液を各ウェルに追加します。 ウェルに添加される基質溶液は完全に無色でなければなりません。 キットの説明書に指定されている時間、光を避けて室温でインキュベートします。 4.3.7 各ウェルに停止液を加えて反応を停止させます。 4.3.8 吸光度値 (OD 値) の測定 マイクロプレートリーダーを 15 分間予熱し、停止液を加えてから 5 分以内にキットの説明書に指定されている波長で吸光度値 (OD) を読み取ります。 実験的妥当性テストは、キットの説明書に指定された条件が満たされた場合にのみ有効です。 結果はキットの説明書に記載されている計算式を使用して計算されました。 結果はキットの説明書に記載の判定基準に基づき判定した。

T/NAASS 058-2023 発売履歴

• 2023 T/NAASS 058-2023 ウシコロナウイルスサンドイッチ酵素免疫吸着法による抗原検出に関する技術規制