T/NAASS 059-2023
ウシ呼吸器合胞体ウイルス病競合酵素免疫吸着法による抗体検出に関する技術基準 (英語版)

規格番号

T/NAASS 059-2023

言語

中国語版, 英語で利用可能

制定年

2023

出版団体

Group Standards of the People's Republic of China

最新版

T/NAASS 059-2023

範囲

用語と定義 以下の用語と定義がこの文書に適用されます。 ウシ呼吸器合胞体ウイルス ウシ呼吸器合胞体ウイルス、BRSV ウシ呼吸器合胞体ウイルスは、パラミクソウイルス科、ニューモウイルス属に属する一本鎖マイナスセンス RNA ウイルスです。 乳牛や肉牛の感染は、急性呼吸器疾患症候群を引き起こす可能性があります。 3.2   競合酵素結合免疫吸着アッセイ  競合酵素結合  サンプルと酵素結合体、その中の対応する抗体は、結合に関して担体上の抗原および酵素結合体と競合し、未結合物質を洗い流します。 競合的に結合した酵素複合体に酵素基質を加え、呈色反応を行って抗体を測定します。 ４ 競合酵素免疫吸着法試験の準備 実験環境、器具、洗浄液の調製、希釈液の調製、トレーサー作業液の調製はキットの指示に従って行うものとする。 希釈用の蒸留水は GB/T 6682 の要件に準拠する必要があります。 試験サンプルとして、ウシ静脈血 2mL～3mL を無菌的に採取し、1h～2h 自然凝固させた後、1500rpm/min～2000rpm/min で 5min 遠心分離し、血清を採取しました。 1.5mL 遠心管。 操作手順 使用前にすべての試薬（コンジュゲートを除く）を室温（20℃～25℃）に戻し、軽く振ったり回転させたりして試薬を均一に混合してください。 4.3.1 プレートを取り外す マイクロプレートを取り出し、操作記録シートにサンプルの位置をマークします。 マイクロプレートの一部を使用する場合は、サンプルを検出するのに十分な量のストリップのみを取り除きます。 未使用のマイクロウェル ストリップは、アルミホイルで包み、乾燥した状態に保ち、密封して 2 ℃～8 ℃で保管してください。 4.3.2 キットの説明書に指定されている濃度に従ってサンプルを追加し、血清サンプルを希釈し、各ウェルにテストするサンプルを追加し、プレートのウェルのレイアウトに従って陰性および陽性対照を追加します。 4.3.3 酵素複合体を希釈する 希釈剤を使用して、酵素複合体を必要な量まで希釈します。 4.3.4 酵素複合体の添加 酵素複合体を各ウェルに加え、よく振盪します。 4.3.5 マイクロプレートを密閉した後、37℃でインキュベートします。 4.3.6 プレートの洗浄 マイクロプレート内の液体を捨て、各プレートのウェルを約 300 μL の洗浄液で 6 回洗浄します。 洗浄後は、プレートの各ウェル内の液体を振り落としてください。 洗浄中および次の試薬を添加する前に、反応プレートが乾燥しないようにし、ウェル内に気泡が入らないようにしてください。 最後に振り落とした後、吸収材に水を加えてください。 プレートをしっかりとクランプし、残りの液体を吸収します 4.3.7 基質の追加 各ウェルに基質溶液を追加します。 遮光して室温でインキュベートします。 4.3.8 停止液を各ウェルに加えて反応を停止させます。 4.3.9 吸光度値 (OD 値) の測定 マイクロプレートリーダーを 15 分間予熱し、停止液を加えてから 5 分以内に波長の吸光度値を読み取ります。 実験的妥当性テストは、キットの説明書に指定された条件が満たされた場合にのみ有効です。 結果はキットの説明書に記載されている計算式を使用して計算されました。 結果はキットの説明書に記載の判定基準に基づき判定した。

T/NAASS 059-2023 発売履歴

• 2023 T/NAASS 059-2023 ウシ呼吸器合胞体ウイルス病競合酵素免疫吸着法による抗体検出に関する技術基準