T/GDBK 006-2023
高速液体クロマトグラフィー/質量分析による焼き菓子中のガンマ-アミノ酪酸-グリオキサール-ホルムアルデヒド付加物の測定 (英語版)

規格番号

T/GDBK 006-2023

言語

中国語版, 英語で利用可能

制定年

2023

出版団体

Group Standards of the People's Republic of China

最新版

T/GDBK 006-2023

範囲

原理: サンプルをn-ヘキサンで脱脂した後、20%メタノール/水溶液で抽出し、抽出液を減圧下で蒸発乾固した後、再溶解し、サンプル溶液を多重反応モニタリング(MRM)に使用します。 高速液体クロマトグラフィー/質量分析計のモード、定量、外部標準法による定量。 5 試薬および材料 5.1 試薬 特に指定のない限り、すべての試薬は分析グレードのものであり、水は GB/T6682 に指定されている一級水です。 メタノール (クロマトグラフィー的に純粋)。 n-ヘキサン (分析的に純粋)。 ギ酸 (クロマトグラフィー的に純粋)。 ホルムアルデヒド（分析グレード）。 グリオキサール (グリオキサール、GO、分析グレード)。 γ-アミノ酪酸 (分析的に純粋)。 5.2 メタノール/水溶液 (20%) の試薬調製: 50 mL メタノール (5.1.1) をピペットで 250 mL メスフラスコに移し、水で所定の容量まで希釈します。 ギ酸/水溶液 (0.1%): 0.25 mL ギ酸 (5.1.3) を 250 mL メスフラスコに移し、水で所定の容量まで希釈します。 5.3 標準 γ-アミノ酪酸-グリオキサール-ホルムアルデヒド付加物標準 (C11H16N2O4 、CAS 番号: 805228-41-5): 純度  98.0% 以上。 5.4 標準液の調製 必要に応じて、γ-アミノ酪酸-グリオキサール-ホルムアルデヒド付加物の濃度 10 mg/L を水で調製し、水で希釈して濃度 (100 μg) の一連の標準液を調製します。 /L、500μg/L、1000μg/L、2000μg/L、3000μg/L、4000μg/L）。 6 機器および装置 6.1 エレクトロスプレーイオン源 (ESI) を備えた液体クロマトグラフ/トリプル四重極質量分析計。 6.2 粉砕機（細かさ：30～100メッシュ）。 6.3 分析天びん、感度は 0.0 g です。 6.4 分析天びん、感度は 0.00 001 グラムです。 6.5 高速遠心分離機 (12 rpm、14 xg)。 6.6 ボルテクサー (300 rpm~3 3 rpm)。 6.7 一般的な実験用ガラス器具。 7 試験手順 7.1 サンプルの準備 粉砕したサンプル (60 メッシュのふるいを通過させた) 3  を計量して 50 mL の遠心管に入れ、サンプルを覆うように 10  mL の n-ヘキサンを加え、5 分間ボルテックスしてから10,000 rpm で回転させ、10 分間遠心分離し、これを 3 回繰り返してグリースを完全に除去し、ドラフト内に置いて残りの n-ヘキサンを蒸発させます。 遠沈管に 20% メタノール/水溶液 15 mL を加え、5 分間ボルテックスした後、10,000 rpm で 10 分間遠心して上清を回収する操作を 2 回繰り返します。 上清を減圧乾固し、２０％メタノール／水を加えて溶解し、５ｍＬに定容する。 0.22 μm ナイロンフィルターでろ過し、HPLC-MS/MS の多重反応モニタリングモード (MRM) を使用してサンプル中のγ-アミノ酪酸-グリオキサール-ホルムアルデヒド含有量を測定します。   7.2 クロマトグラフィーの測定 7.2.1 高速液体クロマトグラフィーの基準条件 a) クロマトグラフィー用カラム: オクタデシルシラン結合シリカゲル (C18)  水性カラム、充填粒子サイズ  5.0 m、カラム長さ 250 mm、内径   ;4.6 m、またはその他の同等のクロマトグラフィーカラム; b) 移動相: A 相は  0.1% ギ酸/水を含む溶液、B 相はメタノール、勾配溶出度: 0~2 min、5 % B～95% B; 2～8 min, 95% B～95% B; 8 min～10 min, 95% B～5% B ;10  ;分～18 分、5% B. c) 流速: 0.4 mL/min; d) カラム温度: 40°C。 e) 注入量: 0.5μL。 7.2.2 質量分析基準条件 a) イオン化モード: 陽イオンエレクトロスプレーイオン化 (ESI+); b) イオンスキャンモード: 多重反応モニタリングモード (MRM); c) キャピラリー電圧: 4000 V d) クラスター除去電圧: 50 V e) 乾燥ガス温度: 300℃ f) 乾燥ガス流量: 10L/min g) 霧化ガス圧力: 50Psi h) モニタリングイオン範囲: m/z 50~800。 i) 定性的および定量的なイオンを表 1 に示します。 表 1 γ-アミノ酪酸-グリオキサール-ホルムアルデヒド付加物の最適化された電圧パラメータ 付加物のタイプ イオンペア衝突電圧 (eV) γ-アミノ酪酸-グリオキサール-ホルムアルデヒド 241/155a 241/69 241/87 -16 -22 -22 a 化合物標準液（100μg/L、500μg/L、1000μg/L、2000μg/L、3000μg/L、4000μg/L）、クロマトグラフィー参照条件（7.2.1）に基づく。 、横軸に標準系列の付加物の質量濃度、縦軸にピーク面積をとった標準曲線を描きます。 7.2.4 試料の測定：試料溶液と標準溶液をそれぞれ 0.5 μL ずつ液体クロマトグラフに注入して分析し、標準溶液の目的ピークの保持時間を定量し、測定対象物質の含有量を算出します。 ピーク面積に基づくサンプル。 付加物のトータルイオンクロマトグラムと質量スペクトルを付録 A に示します。 7.2.5 空実験は、サンプルの重量を量らないことを除いて、上記の測定条件および手順に従って実行するものとする。 8 試験データ処理サンプル中のγ-アミノ酪酸・グリオキサール・ホルムアルデヒド付加物の含有量は、式(1)により算出されます。 ) 式中: х—— サンプル中のγ-アミノ酪酸-グリオキサール-ホルムアルデヒド付加物の含有量、マイクログラム/kg (μg/kg); C  　—— サンプルに添加された化合物の濃度、マイクログラム/リットル (μg/L); V  　—— 試験サンプルの総量、ミリリットル (mL); D  　—— サンプル希釈係数; M  　—— 秤量 サンプルの質量、グラム(g)。 計算結果は、再現性条件下で得られた 3 つの独立した測定結果の算術平均として表され、結果には 3 つの有効数字が保持されます。 9 精度 9.1 一般規定 この文書の精度は GB/T6379.2 の規定に従って決定され、再現性および再現性の値は 95% の信頼水準で計算されています。 9.2 再現性 再現性の条件下では、得られた 2 つの独立した測定結果間の絶対差は算術平均の  10%  を超えてはなりません。 9.3 再現性 再現性条件下では、得られた 2 つの独立した測定結果間の絶対差が算術平均の  10%  を超えてはなりません。 10 試験報告書 試験報告書には、少なくとも次の側面が記載されている必要があります: 　——試験対象; 　——使用した規格; 　——使用した方法; 　——結果; 　——観察された異常現象; 　——試験日。 付録 A (参考付録) γ-アミノ酪酸-グリオキサール-ホルムアルデヒド付加物のトータルイオンクロマトグラムおよび質量スペクトル

T/GDBK 006-2023 発売履歴

• 2023 T/GDBK 006-2023 高速液体クロマトグラフィー/質量分析による焼き菓子中のガンマ-アミノ酪酸-グリオキサール-ホルムアルデヒド付加物の測定