T/GZCX 019-2022
roxburghii およびその製品の多糖類含有量の測定 (英語版)

規格番号

T/GZCX 019-2022

言語

中国語版, 英語で利用可能

制定年

2022

出版団体

Group Standards of the People's Republic of China

最新版

T/GZCX 019-2022

範囲

4  方法原理: 濃硫酸の作用下で、多糖類は単糖類に加水分解され、急速に脱水されてウロン酸誘導体が形成されます。 ウロン酸誘導体はフェノールと反応して、490nm に特徴的な吸収を持つオレンジがかった黄色の溶液を形成します。 。 5  試薬および材料 5.1 特に指定がない限り、GB/T6682 に指定されている分析的に純粋な試薬および一級水のみを使用する必要があります。 5.1.1  グルコース (C6H12O6、CAS 番号: 50-99-7) 標準、純度 ≥ 98.0%。 使用前に、105℃の一定温度で一定の重量になるまで乾燥する必要があります。 5.1.2  硫酸 (H2O4S)、ρ=1.84 g/mL。 5.1.3  無水エタノール (C2H6O)。 5.1.4  フェノール (C6H6O)、再蒸留。 5.2 試薬の調製 5.2.1 グルコース標準溶液 (100 mg/L): グルコース標準液 0.1 g (0.001 g までの精度) を量り、100 mL ビーカーに入れ、少量の水を加えて溶解し、容器に移します。 1000 mL の茶色のメスフラスコに加え、標線まで加え、よく振り、光を避けて 4°C の冷蔵庫に保管します。 5.2.2 80% エタノール溶液: 無水エタノール 80 mL を量り、100 mL メスフラスコに入れ、水を加えて標線まで定容します。 5.2.3  80% フェノール溶液: 80 g のフェノール (0.01 g までの精度) を量り、100 mL ビーカーに入れ、少量の水を加えて溶解し、100 mL の容器に移します。 茶色のメスフラスコに水を加えて標線まで希釈し、よく振り、光を避けて 4℃の冷蔵庫に保管します。 5.2.4 5% フェノール溶液: 80% フェノール溶液 (5.2.3) 5 mL を量り、水 75 mL に溶解し、よく混ぜ、すぐに混合します。 6  機器および装置 6.1  UV 分光光度計。 6.2  高速壁破壊機。   6.3  分析天びん、感度は 0.0001 g。 6.4  超音波抽出器。 6.5  ボルテックスオシレーター。 6.6  遠心分離機、4000 r/分。 6.7  ティッシュマッシャー。 7  分析ステップ 7.1  サンプルの準備: 新鮮なナシ果実の皮をむいて種を取り (3.1)、ティッシュ マッシャーで叩き、均一に混ぜて脇に置き、乾燥したナシ果実を除去します (3.2)。 ウチワサボテンのプリザーブドフルーツ(3.3)に見られるもので、高速ウォールブレーカーで粉砕して粉末にし、置いておきます。 ウチワサボテンの凍結乾燥粉末(3.4)とスプレー乾燥した梨の粉末(3.5)を粉砕します。 後で使用するために均一にします。 7.2  サンプルの抽出 7.2.1  固体サンプル: 0.2 ~ 2 g のサンプル 7.1 を採取し、正確に重量を量り (0.0001 g までの精度)、50 mL のストッパーを置き、遠心分離機 サンプルに水 5 mL を浸透させ、無水エタノール 20 mL をゆっくりと加え、ボルテックス振動子で振り混ぜて均一に混合した後、超音波抽出器に入れて 30 分間超音波抽出します。 抽出後、10分間遠心分離し、上清を捨てます。 沈殿を８０％エタノール溶液１０ｍＬで洗浄し、５分間遠心分離し、洗浄液を捨て、上記沈殿を水とともにナスフラスコに移した。 50 mL の水を加え、超音波抽出器に入れて 30 分間超音波処理し、濾過して濾液を回収します。 沈殿物に水を加え、超音波処理して濾過し、これを 2 回繰り返します。 残渣を２～３回洗浄し、洗浄液とろ液を全量フラスコ２００ｍＬに移し、水を加えて標線まで定容する。 この溶液がサンプル測定溶液です（色が濃すぎる場合は、C18 SPEカートリッジなどで脱色できます）。 サンプルの多糖含有量が高い場合は、分析および測定前に適切に希釈できます。 7.2.2  液体サンプル: シャクナゲ原液 (3.6)、シャクナゲ濃縮果汁 (3.7) などの液体サンプルの場合、サンプル 5 ～ 10 mL を正確に量り、50 mL 遠沈管に入れます。 ストッパーを取り付け、残りの操作を実行します。 7.2.1 と同じです。 7.3  標準検量線 0.0 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.6  mL、0.8 mL、および 1.0 mL をそれぞれ正確に測定し、20 mL の共栓テストに置きます。 チューブを取り出し、水で 1.0mL にします。 5％フェノール溶液（5.2.4）1.0mLを加え、すぐに硫酸（5.1.2）5.0mLを加える（液面に垂直に加え、試験管の壁に触れないよう十分に混合する）反応液を加えて10分間放置し、反応液をボルテックス振動子でよく混合し、試験管を30℃のウォーターバスに20分間入れ、490nmでの吸光度を測定します。 横軸に質量濃度、縦軸に吸光度をとり、標準曲線を描きます。 7.4  ブランク試験はサンプルの測定と並行して実行されます。 すべての試薬を同量取り、同じ分析を使用します。 7.5  サンプルの測定 サンプルを正確に測定します 適量の抽出液 (7.2) を 20 mL 共栓試験管に入れ、5% フェノール溶液 (5.2) 1.0 mL を加えます。 .4）に硫酸（5.1.2）5.0mLを手早く加え（液面に垂直に加え、反応液とよく混ざるように試験管壁に触れないようにして静置する）ボルテックスオシレーターを使用して反応液を十分に混合し、試験管を 30℃のウォーターバスに 20 分間入れて 490nm で反応させ、吸光度を測定します。 8  固体サンプル中の多糖類含有量は質量分率 x として測定され、単位はグラム/100 グラム (g/100g) で表されます。 式(1)に従って計算されます: ) 式中: m1——検量線から求めた試料測定溶液中の糖度、単位はマイクログラム(μg)、V1——試料の固定量、単位はミリリットル (mL); V2 - 比色測定時 除去されたサンプル測定溶液の量、ミリリットル (mL); m2 - サンプル質量、グラム (g); 0.9 - グルコースをグルコースに変換するための補正係数8.2  ナシ生果汁や濃縮ナシ果汁などの液体サンプル中の多糖類含有量は、質量分率=0.910-4 で測定されます…………………… (2) 式中： m1 —— 検量線から求めた試料測定溶液中の糖分、単位はマイクログラム（μg）、V1 —— 試料の一定体積、単位はミリリットル（mL） ; V2 - 比色測定中に除去されたサンプル測定液の量、単位はミリリットル (mL); V - サンプル量、単位はミリリットル (mL); 0.9 - デキストランの補正係数に換算されたグルコース 計算結果は次のとおりです。 小数点第2位に四捨五入。 9  精度: 繰り返し条件下で、得られた 2 つの独立した測定結果間の絶対差は算術平均の 10% を超えません。

T/GZCX 019-2022 発売履歴

• 2022 T/GZCX 019-2022 roxburghii およびその製品の多糖類含有量の測定